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              解決方案
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              人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

              日期:2017-03-15 09:11:56 人氣:1031

              應用領域:
              生物產業
              實驗設備:
              檢測樣品:
              重組人白細胞介素
              檢測項目:
              乙腈殘留
              下載地址:

              重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定

              1 儀器配置

              ①磐諾 GC A91 氣相色譜儀,配置 FID 檢測器

              ②自動頂空進樣器(上海/HS-16A)

              2 實驗方法

              2.1 色譜條件

              進樣口:220℃,分流比 10:1

              色譜柱:DB-WAX 30m×0.32mm×0.50ìm,2.4ml/min(恒流模式)

              爐膛:45℃

              FID:250℃,H2 30ml/min,Air 300ml/min,Make-up 30ml/min

              頂空進樣器:平衡溫度 75℃,定量管溫度 100℃,傳輸管溫度 100℃,平衡時間 30min

              2.2 對照品溶液及供試品溶液制備對照品溶液配制精密稱取乙腈 7.8mg  250ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為對照品溶液。供試品溶液配制精密稱取供試品約 0.5g  5ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為供試品溶液。

              2.3 乙腈含量測定

              分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各 2ml,置 20ml 頂空瓶中,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。

              3 實驗結果

              3.1 重現性試驗

              精密量取 2.2 中所述對照品溶液 2.0ml,共份,置個頂空瓶中,按 2.1~2.3 中方法測定,結果峰面積的相對標準偏差(RSD) 3.08%。

              表 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

              編號

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              平均值

               

               

               

               

               

               

               

               

              峰面積

              32.82

              34.95

              32.72

              32.77

              34.82

              33.64

              33.62

              RSD%

               

               

               

              3.08

               

               

               

               

               

               

               

               

               

               

               

              人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

              圖 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

              3.1 線性關系考查

              精密量取對照品溶液 2.0、1.0、0.5、0.2、0.1ml,各 2 份于 10 個頂空瓶中,再分別加入蒸餾水 0、1.0、1.5、1.8、1.9ml 后,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。以積分面積為縱坐標,2ml H20 中乙腈含量為橫坐標,線性擬合,回歸方程為 Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998。測試結果見表和圖 2。

              重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

              編號

              X

               

              Y 峰面積

               

               

              2ml H20 中乙腈含量/ìg

               

               

               

               

              Test-1

              Test-2

              平均值

               

               

               

               

               

              1

              62.4

              34.25

              33.6

              33.93

               

              2

              31.2

              16.73

              17.32

              17.03

               

              3

              15.6

              8.29

              8.16

              8.23

               

              4

              6.24

              3.5

              3.88

              3.69

               

              5

              3.12

              1.71

              1.68

              1.70

               

              回歸方程:Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998

               人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

              圖 2 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

              3.3 樣品測定

              參考 2.2 中測試。結果見表 3。

               

               

              表 3

              五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定結果

               

               

               

               

               

              供試品批號

              稱樣量/mg

              積分面積

              測定結果

               

               

               

               

              粉劑 20121102

              34.2

              未檢出

              <0.004%

              粉劑 20123012

              36.7

              未檢出

              <0.004%

              粉劑 20121130

              31.9

              未檢出

              <0.004%

              液體 20130303**

              904.8

              1.88

              0.00093%

              液體 20130408**

              524.0

              1.55

              0.0013%

              備注:粉劑樣品,稱量后加入 2.0ml H2O 分析;

              液體樣品,稱量后加入 H2O 定容至 5ml 后,取 2.0ml 分析。

               人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

              圖 3 五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定色譜圖


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